Abstract FR:

Le laboratoire de p. Charnay, au sein duquel j'ai effectue mon travail de these, a isole plusieurs genes murins par similitude de sequence avec le gene a doigts a zinc de drosophile, kruppel. Parmi ces genes, krox-20 et krox-24 sont apparus interessants, d'une part parce qu'ils codent tous deux pour des proteines qui possedent trois doigts a zinc, de sequence proche de celle des doigts a zinc du facteur de transcription humain sp1, et d'autre part, parce que leur expression est inductible lors de la stimulation de cellules en culture par differents facteurs de croissance, au cours de la transition g0/g1. Ceci suggerait que ces facteurs etaient impliques dans des phenomenes de transduction controlant l'entree dans le cycle cellulaire. De plus, le profil d'expression de krox-20, dans les unites segmentees du cerveau posterieur, les rhombomeres 3 et 5, autour de 9 jours de developpement embryonnaire, suggere qu'il pourrait jouer un role dans le controle du processus de segmentation de cette region du systeme nerveux central (snc). Nous avons demontre que les genes krox-20 et krox-24 codent pour des facteurs de transcription, en determinant leurs cibles nucleotidiques et en mettant en evidence leurs capacites transactivatrices dans les cellules en culture. Nous avons ensuite entrepris une analyse fonctionnelle detaillee de la proteine krox-20 en delimitant notamment les regions susceptibles d'entrer en contact direct avec l'adn et avec la machine transcriptionnelle. Nous avons etabli la reconnaissance modulaire de trois bases par chaque doigt de krox-20 et determine la position et l'identite des acides amines intervenant dans l'interaction specifique avec l'adn. Nous avons egalement localise deux domaines dans la region n-terminale de la proteine, riches en acides amines acides, qui sont necessaires et suffisants pour observer une activation transcriptionnelle dans les cellules en culture. Enfin, nous avons entrepris de rechercher des cibles physiologiques du gene krox-20 dans le rhombencephale et mis en evidence le role de krox-20 dans la stimulation de l'expression du gene hox-2. 8 au niveau des rhombomeres 3 et 5