Abstract FR:

La famille des proteines mips est composee de canaux hydriques et de facilitateurs de glycerol. Parmi les canaux hydriques, certains sont selectivement permeables a l'eau, les aquaporines (aqp1, aqp2,), et les autres sont egalement permeables aux petits solutes comme le glycerol, les aquaglyceroporines, dont aqp3 fait partie. Nous avons montre dans un premier temps que la permeabilite au glycerol du globule rouge etait due a la presence d'aqp3. Dans l'intention de mieux comprendre quels etaient les elements proteiques impliques dans la selectivite des proteines mips, nous avons construit des chimeres entre aqp2 et aqp3. L'une d'entre elle, aqp3-aqp2 cter, apres expression dans l'ovocyte de xenope, a permis de montrer que la partie cterminale est impliquee dans le transport d'eau mais pas dans le transport de glycerol des proteines mips. Nous avons egalement montre que les ovocytes de xenope non matures possedaient des permeabilites a l'eau et au glycerol superieures a celles d'ovocytes matures. Ceci est du a l'expression d'un canal ou d'un transporteur endogene. Enfin, nous avons envisage de determiner pour la premiere fois la structure quaternaire d'une aquaglyceroporine : aqp3. Alors qu'aqp1 devoile sa forme tetramerique sur gradient de saccharose, apres solubilisation en conditions non denaturantes, aqp3 sedimente dans des fractions plus legeres sous formes d'un monomere et d'un dimere tres resistant au sds et aux agents reducteurs hydrophiles. Nous n'avons pu conclure quant a son organisation dans les membranes du fait de son eventuelle sensibilite specifique aux detergents non denaturants utilises. Nous avons donc engage des etudes de microscopie electronique de cryofractures de membranes d'ovocytes exprimant aqp1 et aqp3. Nous en avons deduit que la taille d'aqp3 n'etait pas suffisamment differente de celle d'aqp1, pour suggerer une organisation membranaire similaire.