Contribution a l'etude du mode de replication et du mode d'action de l'arn satellite du virus de la mosaique du concombre
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
L'arn satellite du virus de la mosaique du concombre (cmv) est une molecule associee au genome viral, et qui est totalement dependante de celui-ci pour sa replication. Un transcrit comportant l'arn satellite monomerique flanque de sequences extra-satellite produit in planta sert de matrice pour la replication de l'arn satellite lors de l'infection de la plante par le cmv. Un modele de replication est propose dans lequel des sites internes specifiques permettraient a la replicase de se placer sur la matrice et d'initier la synthese des brins (+) et () a partir respectivement de l'extremite 3 du brin (+) et du brin (). Afin de comprendre le role des sequences flanquantes dans le mecanisme de replication, nous avons modifie celles-ci par mutagenese dirigee d'un clone de l'adnc de l'arn satellite r. Les transcrits synthetises in vitro correspondant aux adnc modifies ont ete co-inocules a de jeunes plants de tomate avec de l'arn viral purifie. Nous avons pu montrer que les sequences flanquantes initiales n'ont aucun role specifique pour la replication de l'arn satellite du cmv. Cependant quelles que soient ces sequences, elles diminuent tres fortement l'activite biologique des transcrits. Une construction chimerique produisant un transcrit comportant la sequence du brin () de l'arn satellite a ete introduit dans le genome du tabac. Apres inoculation par du cmv, ces plantes sont le siege d'une intense amplification de l'arn satellite. Ces resultats confirment la possibilite pour la replicase virale de reconnaitre l'arn satellite brin () malgre les sequences ajoutees en 3 et repliquer l'arn satellite brin(+). Tous nos resultats sont en accord avec l'hypothese selon laquelle l'arn satellite du cmv pourrait se repliquer selon un mecanisme similaire a celui des arn viraux. Des tomates transgeniques ont ete obtenues, lesquelles produisent un transcrit comportant l'arn satellite i17n. Inoculees par le v