Abstract FR:

Le rabbit haemorrhagic disease virus (RHDV) est responsable d'hépatites fulminantes et peut tuer 90% d'une population de lapins en moins de 48h. Le RHDV est un calicivirus du genre lagovirus. Non enveloppé, il présente un ARN simple brin de polarité positive de 7,5 KB pour génome. Cet ARN génomique possède 2 ORF : l'ORF1 codant pour une polyprotéine de 257 KDA et l'ORF2 codant pour la protéine structurale VP10. Cette polyprotéine présente 6 protéines non structurales dont l'hélicase, la protéase et l'ARN polymérase et 2 protéines structurales, la VPG et la protéine de capside. La protéase, apparentée au groupe des chymotrypsine-like cystéine protéases, semble être la seule protéine virale impliquée dans le processus de maturation. Les études réalisées jusqu'alors ont permis de montrer que le processus de maturation se déroulait en au moins 2 étapes et conduisait à la libération de 8 protéines impliquant 7 sites de clivage protéolytique. Trois sites spécifiquement clivés par la protéase avaient été décrits auparavant par différents auteurs : EG (718-719), EG (1108-1109) et EG (1767-1768) et, aussi, un 4ème site suspecté, le site ET (1251-1252). Le virus RHDV ne se multipliant pas en culture cellulaire, nous avons développé une technique basée sur l'utilisation du gène de la luciférase comme gène rapporteur. Cette technique originale a permis de confirmer les 3 sites EG déjà décrits, d'identifier le quatrième responsable de la maturation primiaire, le site EG (143-144) et 2 sites faiblement clivés EG (339-340) et EG (776-777). Ces 6 sites de clivage s'intègrent parfaitement dans le modèle de maturation proposé par König et al. (1998). Ce travail de thèse permet de comparer pour la première fois l'activité protéolytique de la protéase courte (1109-1251) avec celle du précurseur P72 (protéase-polymérase). La protéase courte est capable d'une activité protéolytique trans et cis au niveau de 4 sites cités précédemment. Cependant, le précurseur P72 présente la meilleure efficacité de clivage et semble responsable de la maturation complète de la polyprotéine du RHDV.