thesis

Caracterisation pharmacologique, biochimique et immuno-chimique d'une nouvelle proteine liant l'iodocyanopindolol : icypbp

Defense date:

Jan. 1, 1996

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Institution:

Paris 7

Disciplines:

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Abstract FR:

Une hypothese avancee, etait la presence d'une composante non-beta3 recepteur beta-adrenergique (ar) dans la reponse beta-adrenergique atypique. Ces sites de liaison atypiques ont ete detectes par le 125i-iodocyanopindolol, un radioligand beta-adrenergique, et marques par un derive portant un groupement diazirine, dans des membranes preparees a partir du muscle lisse de colon de rat. Ces sites de liaison specifiques (icypbp) presentent les caracteristiques propres a un recepteur: saturabilite, stereo-selectivite et reversibilite. Ils sont deplaces par plusieurs agonistes des beta3-ars, et certains antagonistes beta-adrenergiques, mais ni par les agonistes beta-adrenergiques classiques (epinephrine, norepinephrine, isoproterenol), ni par le brl-37344 (agoniste beta3-ar), la serotonine ou la dopamine. Les sites marques ont ete visualises par autoratiographie apres separation par electrophorese (34 kda). L'icypbp isolee des membranes est sensible au clivage chimique par le bromure de cyanogene et par l'acide formique. Les fragments ont ete purifies par chromatographie en phse liquide et leur sequence en acides amines a ete determinee. Ces sequences sont notablement differentes de celles trouvees pour les beta-ars. Des anticorps ont ete obtenus contre un peptide synthetique correspondant a l'une des sequences. Ces anticorps purifies se sont reveles capables d'immunoprecipiter l'icypbp. Nous trouvons un clone dans la banque d'adn complementaires de squelettique humain, qui code pour la sequence partielle en acides amines de l'icypbp de rat