thesis

Le polymorphisme des chaines lourdes de la myosine du muscle squelettique chez les poissons. Caracterisation d'adn complementaires de formes developpementales chez la truite et d'un gene thermo-dependant chez la carpe

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Rennes 1

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Chez les poissons le muscle squelettique myotomal est compose de trois types distincts de muscles (blanc, rouge et rose). Au niveau proteique une seule chaine lourde de la myosine (mhc), distincte de celle du muscle rouge, a pu etre revelee dans le muscle blanc par les techniques electrophoretiques. De plus cette isoforme ne varie pas au cours du developpement chez la truite. Pour etudier l'expression des transcrits des mhc du muscle blanc au cours du developpement nous avons realise deux banques d'adnc a des stades precoce et tardif. Nous avons isole le clone b6, present dans les deux banques et codant pour une mhc. Le clone b6 est exprimee fortement dans le muscle blanc tres precocement et son expression persiste au cours du developpement. De plus cette isoforme de type rapide est faiblement exprimee dans le muscle rouge. La caracterisation du polymorphisme des transcrits des mhc par la technique de 3'race pcr fait apparaitre des isoformes tres homologues ou resultant de genes dupliques. Une seconde approche portant sur l'etude du gene thermo-dependant de la mhc isole chez la carpe nous a permis de caracteriser un fragment de 2,9 kb qui renferme les septs premiers exons de la region nh2 terminale ainsi qu'une partie de la region promotrice du gene. Ce gene est exprime specifiquement dans le muscle blanc chez les animaux acclimates a 28c. L'etude de la region promotrice revele la presence de boites specifiques du muscle (boite e et site mef2). Les experiences de transfection in vivo et in vitro de differentes constructions du promoteur en amont du gene reporteur cat demontrent l'importance de ces boites dans le muscle blanc. De plus des differences selon l'environnement cellulaire (types cellulaire) ont pu etre observees laissant supposer une regulation specifique des genes poissons par rapport aux mammiferes