thesis

Caracterisation de proteines antifongiques et antibacteriennes induites au cours de la reaction d'hypersensibilite du tabac au vmt. Clonage et etude de l'expression de deux lysozymes

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Jan. 1, 1993

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L'accumulation de proteines pr (pathogenesis-related) represente une des modifications metaboliques majeures observees au cours de la reaction d'hypersensibilite du tabac au virus de la mosaique du tabac (vmt). Une nouvelle proteine pr basique de 22 kda serologiquement reliee aux proteines thaumatin-like a pu etre identifiee. Sa composition en acides amines et sa sequence nh#2-terminale et indiquent qu'il s'agit de l'osmotine, dont l'accumulation dans les cellules de tabac suite a un stress salin avait ete decrite. L'activite antifongique des proteines de ce groupe est maintenant connue. Parallelement, la presence de proteines pr presentant une activite antibacterienne a ete recherchee. Une stimulation de l'activite lysozyme au cours de la reaction d'hypersensibilite a ete observee. Parmi les proteines presentant cette activite, deux proteines basiques ayant une activite specifique elevee, voisine de celle de certains lysozymes animaux ont ete purifiees. Un serum polyclonal dirige contre l'un de ces lysozymes a permis l'identification d'un lysozyme acide presentant une activite vis-a-vis du 4-methylombelliferyl-chitotriose, un substrat synthetique des lysozymes. Le clonage des adnc de ces lysozymes a revele que ces proteines sont homologues aux chitinases de classe iii de concombre et d'arabidopsis et aux chitinases-lysozymes de parthenocissus quinquifolia et d'hevea. Des sondes moleculaires correspondant aux lysozymes ont ete utilisees pour suivre l'accumulation des transcrits au cours de la reaction d'hypersensibilite. L'etude de l'expression des genes des lysozymes dans differents organes de la plante saine indique une regulation egalement liee au developpement: la presence constitutive du lysozyme acide dans les tissus vasculaires de la tige et celle du lysozyme basique dans les sepales de la fleur ont ete observees