Abstract FR:

Chez bordetella pertussis, l'agent etiologique de la coqueluche, l'expression des principaux facteurs de virulence dont l'hemagglutintine filamenteuse (fhab), l'adenylcyclase (cyaa) et la toxine pertussique (ptx) est controlee, au niveau transcriptionnel, de facon coordonnee, en reponse a des conditions de l'environnement, par le locus bvg. Ce locus code pour deux proteines, bvga (le regulateur transcriptionnel) et bvgs (la proteine senseur transmembranaire), membres des systemes a deux composants et qui communiquent par une cascade de phosphorylations. Dans le present travail, nous avons analyse la regulation transcriptionnelle des facteurs de virulence de b. Pertussis par bvga. Dans un premier temps, nous avons purifie l'arn polymerase de b. Pertussis pour l'utiliser dans un systeme de transcription in vitro. Avec ce systeme, nous avons pu demontrer que la transcription des genes de virulence bvg, fha, cya et ptx necessite uniquement l'arn polymerase de b. Pertussis et la forme phosphorylee de bvga et que le degre de phosphorylation de bvga determine le niveau de transcription de chacun des genes cibles. Afin de connaitre les facteurs qui conferent la specificite et la selectivite des interactions arn polymerase-activateur transcriptionnel, nous avons entrepris, par la suite, de cloner et de caracteriser la sous-unite de l'arn polymerase de b. Pertussis. Les donnees in vivo que nous avons obtenues, laissent suggerer que des d'interactions specifiques entre bvga et pourraient etre importantes pour l'activation du promoteur fha. Pour etudier in vitro la selectivite et la specificite de l'arn polymerase de b. Pertussis au niveau des contacts proteiques etablis avec bvga, nous avons mis en uvre une strategie de construction d'arn polymerases reconstituees hybrides b. Pertussis-e. Coli. Nos resultats de transcription in vitro suggerent que les interactions proteine-proteine entre les activateurs transcriptionnels et l'arn polymerase peuvent etre d'une grande selectivite. L'ensemble de nos resultats a permis d'eclaircir certains mecanismes de la regulation de l'expression des facteurs de virulence de b. Pertussis, regulation qui est a la base du pouvoir pathogene de cette bacterie.