Etude de la regulation globale du metabolisme des sucres chez lactobacillus sakei
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Abstract FR:
Les genes codant pour la proteine hpr et l'enzyme i du systeme des phosphotransferases (pts) de lactobacillus sakei ont ete clones et sequences. Une collection de mutants a ete obtenue : deux mutants ponctuels isoles comme resistants au 2 deoxyglucose, une serie de mutants obtenus par integration, un mutant ponctuel de ptsi contenant une mutation ala 190 et un mutant possedant une large deletion de ptsi. L'etude du phenotype de ces mutants suggere que le pts regule negativement l'utilisation du ribose et de l'arabinose, puisque les mutations conduisaient a une croissance acceleree sur les deux sucres. Nous nous sommes interesse au metabolisme du ribose. Un fragment de 7 kb qui contient les genes rbsu, rbsd, rbsk et rbsr qui interviennent dans le transport et la phosphorylation du ribose a ete sequence. Les genes codant pour rbsa, rbsb et rbsc, les sous-unites du transporteur abc du ribose chez escherichia coli et bacillus subtilis, ne sont pas presents dans l'operon rbs. De plus, un nouveau gene, rbsu, dont le produit est homologue a glta, un transporteur de glucose chez staphylococcus aureus, a ete observe en amont de rbsd. Rbsu, rbsd et rbsk sont cotranscrits, et l'expression de ces genes est regulee par rbsr. Des mesures de transport et de phosphorylation du ribose chez la souche sauvage et les differents mutants ptsi, ont montre que la vitesse de transport et de phosphorylation etait augmentee chez les mutants. En amont de l'operon rbs, le gene acka codant pour une acetate kinase a ete observe. La presence de ce gene en amont des genes rbs n'est peut-etre pas fortuite puisque la dephosphorylation de l'acetyl-p par l'acetate kinase constitue la derniere etape de la degradation du ribose. Un deuxieme gene codant pour une acetate kinase, ackb, a ete clone, ackb se trouve dans une region eloignee du chromosome par rapport a acka. La presence de deux copies du gene codant pour une acetate kinase n'avait pas encore ete observee chez d'autres microorganismes.