Abstract FR:

La tyrosine hydroxylase (th) catalyse l'etape limitante de la synthese de catecholamines. Quatre arnm-th differents peuvent etre synthetises a partir d'un seul gene humain par epissage alternatif. Leur repartition, analysee par cartographie a la nuclease s1, varie selon les tissus etudes; les arnm de th1 et th2 sont les especes d'arnm-th les plus representees dans le cerveau humain. Les quatre arnm-th ont ete exprimes dans l'ovocyte de xenope, les activites enzymatiques specifiques de isoformes correspondantes different. Pour analyser cette variation, les isoformes-th ont ete exprimees dans e. Coli et purifiees. Les parametres cinetiques des proteines th1 et th2 ont ete determines avant et apres phosphorylation par des kinases dependantes de l'ampv (pka) et de la calmoduline (pkcalm). L'analyse cinetique des effets de la phosphorylation dependante d'un residu proline (pkdp) suggere une regulation allosterique de l'activite th. La sequence peptidique des isoformes th phosphorylees par ces differentes kinases a montre que l'epissage alternatif genere des sites supplementaires de phosphorylation dans la th2 par le pkcalm et dans la th4 par la pkdp. Ce mecanisme pourrait representer un nouveau mode de regulation de la synthese des catecholamines