Abstract FR:

Dans le but de caracteriser une actine primitive, nous avons entrepris l'etude de cette proteine chez un pluricellulaire diploblastique: l'eponge d'eau douce ephydatia mulleri. La purification biochimique de l'actine de cet animal nous a permis de montrer qu'au moins 5 isoformes etaient exprimees, presentant des points isoelectriques proches. Par traduction in vitro d'arn totaux extraits d'eponges a differents stades de culture, nous avons montre de plus, que ces 5 isoformes etaient exprimees sequentiellement au cours du developpement d'e. Mulleri. La caracterisation partielle, au niveau adnc, de l'isoforme majoritaire a4, a permis de confirmer le caractere cytoplasmique de cette actine et sa plus grande ressemblance vis-a-vis des actines deuterostomiennes que protostomiennes ou unicellulaires. Au niveau genomique, une analyse par southern blot suggere qu'e. Mulleri pourrait receler au moins 10 sequences reliees a l'actine. Parmi celles-ci, certaines pourraient etre pseudogeniques puisque l'etude d'un clone adn genomique a revele l'existence d'au moins 3 genes regroupes, presentant des modifications de sequence tres importantes (deletions, mutations, insertions) caracteristiques d'un etat non fonctionnel. D'autre part, dans ce meme clone genomique, nous avons isole un fragment de gene d'actine apparemment fonctionnel, presentant une region 5 codante caracteristique d'une sequence de classe ii met-gly et un intron entre les codons 84 et 85. Ce dernier n'avait ete observe que dans le gene 6. 3 de l'hydre (autre diploblastique) et les genes d'actine des muscles lisses de vertebres. Ces resultats indiquent que l'actine et les genes correspondants presentent, chez l'eponge e. Mulleri, des caracteres typiques des invertebres (genes regroupes, sequences de type cytoplasmiques) mais sont nettement plus proches des metazoaires meme tres evolues (isoformes multiples et representation genomique importante) que des unicellulaires