Abstract FR:

Les genes des immunoglobulines (ig) et des tcr sont assembles a partir de segments geniques par recombinaison site-specifique au cours du developpement des lymphocytes. Ces rearrangements s'accompagnent de remaniements au niveau des jonctions. L'une des proteines responsables de cette diversite jonctionnelle est la deoxynucleotidyl transferase terminale (tdt) qui catalyse l'addition de nucleotides dits n. Alors qu'une seule forme de tdt etait connue, nous avons isole chez la souris, un second arnm codant pour une nouvelle isoforme de cet enzyme. Les 2 arnm resultent de l'epissage alternatif d'un meme precurseur et different par l'insertion de 60 nucleotides, correspondant a un nouvel exon localise en 3' du gene. Ces 2 arnm sont presents dans un meme rapport dans les pro-lymphocytes b et t, le messager court etant majoritaire. La proteine codee par le messager long ne differe de la forme courte que par l'insertion de 20 aa dans la region c-terminale. Nous avons montre que les 2 formes de tdt exprimees dans des cellules ont des localisations differentes. La forme courte est nucleaire, alors que la forme longue est cytoplasmique. Les 2 proteines different aussi par leur activite catalytique et leur stabilite. Dans un systeme de transfection transitoire, seule la forme courte polymerise l'addition de nucleotides sur un substrat de recombinaison exogene. L'expression du gene de la tdt est regulee au cours du developpement de la souris. Indecelable durant la periode foetale, l'expression de la tdt ne commence qu'apres la naissance. Chez l'adulte, la tdt n'est exprimee qu'au moment du rearrangement des igh et cesse lors du rearrangement des igl. Nous avons modifie le spectre d'expression de la tdt au cours du developpement et de l'ontogenese des cellules b par transgenese de l'isoforme majoritaire. L'analyse de la diversite jonctionnelle des ig chez ces souris montre que la diversite n peut etre etendue aux igl. L'expression de la tdt a un stade embryonnaire precoce, permet d'obtenir un repertoire neonatal des ig plus diversifie. Ceci demontre que la presence de regions n est uniquement dependante de l'expression de la tdt et de son recrutement par le complexe de recombinaison sur tous les segments ig a rearranger. Enfin, l'expression du transgene tdt semble sans consequences apparentes sur le comportement immunitaire de ces souris.