thesis

Etude de la regulation des genes d'ubiquitine et caracterisation moleculaire de differentes proteines intervenant dans le systeme de conjugaison et de degradation ubiquitine-dependant chez les plantes superieures

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Jan. 1, 1994

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Ce travail de these est consacre a la caracterisation moleculaire et a la regulation transcriptionnelle de differentes proteines du systeme de conjugaison et de degradation ubiquitine-dependant chez les plantes superieures, incluant les genes d'ubiquitines, les genes d'enzymes de conjugaison de type e2 et de sous-unites de proteasomes. Quatre arn messagers codant pour des polyubiquitines ont ete etudies. Ils sont differentiellement regules dans des protoplastes en culture, mais aussi dans differentes conditions de stress. Un gene codant pour une polyubiquitine a ete isole et caracterise au point de vue de sa structure. Une recherche informatique menee sur le promoteur proximal de ce gene a montre l'existence de differentes sequences similaires a des elements de regulation cis caracterises chez d'autres genes eucaryotes. Les differents elements structuraux du gene ont ete places devant un gene rapporteur et testes en expression transitoire dans les protoplastes de n. Tabacum. Grace a un programme de sequencage systematique (gdr-genome arabidopsis), j'ai pu caracteriser trois adnc differents codant pour des enzymes de conjugaison de l'ubiquitine et deux clones codant pour des sous-unites du proteasome. Les enzymes e2 sont differentiellement regulees dans des lanieres d'arabidopsis incubees dans un milieu de culture permettant la division cellulaire. Concernant les genes des sous-unites alpha et beta du proteasome, leurs expresssions semblent liees a la proliferation cellulaire. Des experiences d'inhibition de la synthese de l'adn grace a de l'hydroxyluree ont montre que leur accumulation n'est pas strictement couplee a la phase s mais plutot a g1/s. En conclusion, tous ces resultats suggerent que le systeme de conjugaison et de proteolyse ubiquitine-dependant est essentiel pour la re-initiation du cycle cellulaire chez les plantes