Abstract FR:

La segregation fidele des chromosomes en mitose repose sur des interactions specifiques entre les kinetochores et les microtubules du fuseau mitotique. Ces interactions sont regulees pendant le cycle cellulaire de la levure saccharomyces cerevisiae, etant faibles en interphase et elevees en mitose, et necessitent l'activite d'une phosphatase de type 1 et d'une kinase antagoniste. Plus precisement, le mutant de la phosphatase de type 1 glc7-10 montre un arret de croissance en mitose a temperature restrictive et presente une augmentation de la frequence de perte d'un chromosome artificiel a temperature semi-permissive. In vitro, le kinetochore de ce mutant presente une faible activite de liaison aux microtubules. Ces phenotypes sont correles a l'hyperphosphorylation de l'extremite c-terminale de ndc10p, une proteine du complexe cbf3 du kinetochore. Cette hyperphosphorylation empeche la fixation du kinetochore aux microtubules. De plus, l'arret de croissance en mitose induit par la mutation glc7-10 est aboli dans des mutants d'inactivation du checkpoint, suggerant que des defauts d'interaction entre les kinetochores et les microtubules peuvent activer le checkpoint. Cette activation ne necessite pas les derniers 122 acides amines de ndc10p puisqu'une souche portant la deletion correspondante (122ndc10) peut encore activer le checkpoint. Par contre, les kinetochores de cette meme souche 122ndc10 ne peuvent plus lier les microtubules in vitro, ce qui indique que la partie c-terminale de ndc10p est necessaire a la fixation du kinetochore aux microtubules in vitro.