Abstract FR:

Sonic hedgehog (shh) est une molecule secretee qui est implique dans le developpement embryonnaire des vertebres. Ce gene est co-exprime avec axial, un facteur transcriptionnel de la famille winged-helix, dans les tissus axiaux, en particulier la notochorde et le plancher du tube neural. Cette co-expression indique que ce facteur transcriptionnel axial pourrait activer directement le gene shh. Pour tester cette hypothese, le gene shh de poisson-zebre a ete isole et cartographie. Le promoteur shh a ete lie au gene rapporteur cat et caracterise par des experiences de co-transfection effectuees dans les cellules hela en presence d'un vecteur d'expression de la proteine axial. Un promoteur (-155shhcat) peut etre active par axial, mais aussi son homologue hnf3 de rat, de facon dose-dependante. Par des experiences de retard de migration et de mutation, il est montre que cet effet est du a deux sites de liaison qui se trouvent dans ce promoteur. Car l'acide retinoique (ra) peut aussi induire une expression ectopique de shh chez les embryons de poulet et de poisson-zebre. Un site du type dr5-rare dans ce shh promoteur a ete remarque, qui se lie avec heterodimere rar/rxr et qui rend ce promoteur inductible par le recepteur de l'acide retinoique en presence de son propre ligand dans des experiences in vitro. Pour les analyses in vivo, le promoteur est lie avec le gene rapporteur lacz d'e. Coli et analyse chez les embryons de souris et poisson-zebre. Il est montre que le fragment regulateur 0,8 kb du gene shh, contenant les sites de liaison pour rar/rxr et axial (hnf3), est suffisant pour declencher l'expression de ce gene dans la partie posterieure du bourgeon des membres chez la souris. En revanche, un element indefini, situe dans la region de 5,8 kb en aval, est necessaire pour l'expression de ce gene dans la notochorde et le plancher du tube neural chez le poisson-zebre.