Etude des hemocytes de drosophile et de leur role dans la reponse immunitaire
Institution:
Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)Disciplines:
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L'objectif de ce travail de these etait d'etudier les cellules sanguines (ou hemocytes) de drosophile et leur role au cours de la reponse immunitaire. Dans un premier temps, nous avons recherche de nouveaux outils pour l'etude des hemocytes au stade larvaire. Pour ceci, nous avons utilise la technique de l'enhancer trap. Cette technique se base sur l'insertion dans le genome, d'un transposon contenant un gene rapporteur place sous le controle d'un promoteur minimal et ubiquitaire. Le transposon s'insere frequemment dans les regions regulatrices des genes et se place ainsi sous leur controle. Dans ce cas, l'expression du transposon reflete celle du gene hote et peut etre suivie grace au gene rapporteur. De plus, une telle insertion genere souvent une mutation. Nous avons crible 1341 lignees enhancer trap de drosophile en recherchant d'une part, une expression du gene rapporteur dans les hemocytes larvaires, et d'autre part, des phenotypes en relation avec les cellules sanguines. Nous avons ainsi identifie plusieurs lignees correspondant a des marqueurs d'hemocytes larvaires. Nous avons egalement isole un nouveau mutant caracterise par l'absence d'hemocytes larvaires et par une mort cellulaire importante dans l'organe hematopoietiques ; ce mutant a ete appele domino. Dans un second temps, grace a domino, nous avons etudie le role des hemocytes dans la reponse immunitaire chez la larve de drosophile. Nous avons montre que : (i) les hemocytes ne sont pas necessaires pour l'induction de la synthese des peptides antimicrobiens en reponse a une blessure septique ; (ii) en absence d'hemocytes, les reactions de melanisation sont affectees, mais pas abolies. Des experiences de survies larvaires suite a une blessure ou a une infection revelent l'importance des cellules sanguines dans les processus de defense de l'hote. Enfin, la troisieme partie de cette these a consiste en une etude fonctionnelle et moleculaire de domino. Nos resultats indiquent que domino est implique dans la proliferation cellulaire, qu'il code pour deux transcrits de 10 et 11 kb et que la proteine correspondante contient un domaine atpase adn-dependant, et appartient de ce fait a la famille des proteines swi2/snf2.