Analyse fonctionnelle du gene sdc25 de la levure saccharomyces cerevisiae
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Abstract FR:
Chez la levure saccharomyces cerevisiae le produit du gene cdc25 est necessaire pour le deroulement du cycle cellulaire. Au cours de la recherche des suppresseurs de la mutation cdc25, la partie 3' du gene sdc25 homologue a cdc25 a ete isole. Le produit de la partie 3' du gene sdc25 est le premier facteur d'echange sur rasp a avoir ete identifie. Le gene sdc25 code pour un polypeptide de 1253 acides amines. Le produit de transcription de sdc25 a ete identifie. La deletion du gene sdc25 n'est pas letale et ne confere aucun phenotype particulier. Nous avons construit des genes chimeriques entre sdc25 et cdc25 par recombinaison homeologue in vivo. L'analyse fonctionnelle de ces genes chimeriques a montre que le remplacement de la partie 5' du gene sdc25 par la partie 5' du gene cdc25 conduit a une proteine chimerique active. Nous avons caracterise le produit de la partie 3' du gene sdc25. Il correspond a un polypeptide de 62 kda accroche a la membrane plasmique. Ce polypeptide est instable et les 169 derniers acides amines du produit du gene sdc25 sont impliques dans son instabilite. Cette region contient un motif, appele cdb, responsable de la degradation par la voie de l'ubiquitine chez les cyclines. L'absence de detection du produit du gene entier, peut suggerer une grande instabilite du produit. Cela peut egalement refleter l'existence de differents mecanismes pour reguler l'expression de ces deux genes. Une regulation differente entre les genes cdc25 et sdc25 au niveau transcriptionnel a ete recemment observee. L'expression des arnm sdc25 en fin de croissance serait une indication des conditions physiologiques dans lesquelles sdc25 doit etre fonctionnel