Abstract FR:

Le gene de la tyrosine aminotransferase (tat) de rat est exprime specifiquement dans le foie et sa transcriptioin est activee par les glucocorticoides. Apres avoir analyse la structure chromatinienne de ce gene, nous avons etudie sa regulation transcriptionnelle en visualiant les empreintes que les facteurs proteiques produisent lorsqu'ils se lient a l'adn. Ces interactions adn/proteines ont ete analysees dans des conditions experimentales qui se rapprochent au plus des conditions physiologiques de vie de la cellule. Pour realiser cette analyse nous avons tout d'abord developpe une methode qui permet de sequencer un fragment d'adn de 300 bases compris une seule fois dans les 3 milliards de bases qui composent l'adn genomique de mammiferes. Cette methode a ensuite ete appliquee pour reveler les empreintes in vivo des facteurs proteiques lies au gene de la tat. Le modele classique du controle de la transcription des genes regules par les hormones steroides est que: 1) le recepteur est active par la liaison de son hormone correspont; 2) le recepteur active se lie a l'adn sur des sites specifiques. Il est generalement admis que le recepteur active et lie a l'adn agit sur la frequence d'initiation de la transcription en interagissant avec les proteines du complexe de la machinerie transcriptionnelle. Cette presente etude nous permet de suggerer que cette interaction directe ne serait pas necessaire pour activer la transcription du gene de la tat. En effet on observe in vivo apres stimulation hormonale, non pas la liaison du recepteur des glucocorticoides, mais la liaison d'un autre facteur (hnf5) sur un site qui in vitro lie de maniere specifique et mutuellement exclusive ces deux proteines. Cette liaison du facteur hnf5 est observee apres seulement 10 minutes de stimulation hormonale ce qui suggere fortement que ce facteur participe a l'activation hormonale de la transcription du gene de la tat