Abstract FR:

Les mutations aux loci w et steel de la souris affectent le developpement des cellules souches hematopoietiques, des cellules germinales primordiales, des melanoblastes et des cellules interstitielles de cajal. Le proto-oncogene c-kit, qui code pour le recepteur transmembranaire a activite tyrosine kinase kit, est allelique du locus w, tandis que steel code pour le facteur de croissance scf (stem cell factor), ligand de kit. Le couple kit/scf est implique dans la migration, la proliferation et/ou la survie des cibles cellulaires des mutations w et steel. Les souris heterozygotes pour les mutations w#e#i et w#r#i#o ont un pelage depigmente, du a la mort precoce des precurseur des melanocytes. Cependant, 3% des souris portent une tache de reversion, i. E. De phenotype sauvage, sur leur pelage. Nous avons montre que certaines taches resultent de recombinaisons mitotiques entre chromosomes homologues. D'autres taches ne sont pas dues a la perte de l'allele mutant ; une surexpression de c-kit ou une complementation de la mutation par l'activation d'un autre gene pourraient etre en cause. Notre analyse genetique et moleculaire des taches de reversion phenotypique apporte la premiere demonstration de l'existence de recombinaisons spontanees lors des mitoses au cours de l'embryogenese. Ce resultat est en accord avec l'hypothese selon laquelle les recombinaisons mitotiques peuvent initier des tumeurs, tel le retinoblastome. Nous avons egalement isole le gene c-kit murin complet, et caracterise 4. 2 kb de la sequence en amont du gene. Cette sequence est riche en nucleotides g et c, ne contient pas les consensus classiques tata et caat, et porte une activite promoteur: fusionnee au gene rapporteur lacz, elle induit l'expression de b-galactosidase dans des cellules transfectees. Quatre lignees de souris transgeniques portant le transgene kit/lacz ont ete obtenues et les profils d'expression analyses. Les donnees ainsi obtenues indiquent: (i) l'absence des regions regulatrices conferant la tissu-specificite chez l'embryon, (ii) une expression inattendue du transgene dans la partie neurale de la retine, et (iii) une grande sensibilite du transgene aux effets de position. Nous avons tire parti de cette derniere particularite pour tester la potentialite de sequences d'attachement a la matrice (sar) a tamponner les effets de position en transgenese. La recherche des elements cis-regulateurs de c-kit est en cours