Micropropagation du jojoba simmondsia chinensis (link) schneider par culture de tissus. Mise au point de deux protocoles d'obtention d'embryons somatiques. Caracterisation moleculaire de la competence a l'embryogenese somatique
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Le jojoba, petit arbuste oleagineux, a fort interet economique grace a une cire liquide exceptionnelle, est recherche dans des domaines aussi divers allant de l'industrie automobile a la cosmetique. Espece dioique, polyploide a pollinisation anemophile, le jojoba ne peut etre propage par semis, mais propage vegetativement afin de conserver les proprietes des genotypes d'elites femelles selectionnes. Le travail presente a un double objectif. Sur le plan de la culture de tissus, a partir de cultures primaires de meristemes ou de boutures de nuds de tiges une technique permettant le cycle complet de la regeneration est decrite. Pour la premiere fois, a partir d'explants de tissus foliaires, la formation d'embryons somatiques a ete reussie. Le deuxieme objectif de notre travail a ete de caracteriser les evenements metaboliques qui ont permis d'aboutir a l'embryogenese somatique. L'etude du polymorphisme enzymatique des pox, est, pgi et adh a montre des differences entre les clones embryogenes et non embryogenes. Chez les clones embryogenes, une activite metabolique intense est traduite par une forte synthese proteique accompagnee d'une absorption reguliere des ions nitrate et ammonium engendrant une baisse globale du ph dans les milieux de culture. Cette activite metabolique est confirmee par l'etude des enzymes impliquees dans l'assimilation de l'azote mineral en azote organique (nr, gs, gdh, gogat). Au cours du cycle clonal, la periode favorable au prelevement des explants pour l'induction de l'embryogenese somatique correspond a la teneur maximale en polyamines libres notamment en putrescine. Les quantites en polyamines accumulees chez un clone embryogene sont superieures a celle accumulees chez un clone non embryogenes. La formation des embryons somatiques fait suite a une chute des teneurs en polyamines libres notamment de la putrescine. Des correlations entre l'expression de la competence a l'embryogenese somatique et la voie de l'assimilation de l'azote ont ete etablies, soulignant le role des polyamines en relation avec la biosynthese de l'ethylene