Organisation de la region posterieure de l'embryon de poisson-zebre : caracterisation de deux genes a homeoboite exprimes pendant la gastrulation
Institution:
Paris 7Disciplines:
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La gastrulation des vertebres est une phase du developpement particulierement captivante. Nous avons choisi d'aborder son etude sur l'embryon de poisson-zebre, un vertebre de plus en plus utilise en genetique du developpement. Chez cette espece, l'isolement de deux genes (zf-cadl et evel) a ete realise. Leurs sequences contiennent des homeoboites divergentes: zf-cadl possede une boite de type caudal et evel a une boite de la famille even-skipped. Le gene evel semble etre un nouveau membre de la famille even-skipped. Il est interessant d'etudier sa conservation evolutive et sa localisation chromosomique. Les patrons d'expression de ces deux genes ont ete decrits en detail a partir de donnees d'hybridation in situ et in toto. Les expressions de ces deux genes debutent avant la gastrulation dans la zone marginale de l'embryon. Zf-cadl est exprime dans la region posterieure presomptive et definitive. L'expression de evel est ventrale pendant la gastrulation et caudale pendant la somitogenese. Elle est inhibee dans des embryons dorsalises au licl: il existe une correlation entre expression de evel et specification ventrale. Chez les mutants spadetail, un nombre anormalement eleve de cellules restent dans la region ventrale et expriment evel: il y a correlation entre expression de evel et position ventrale dans l'embryon. L'utilisation de evel comme marqueur de la region ventrale semble prometteuse, car on connait peu de marqueurs de cette region chez les vertebres. L'etude des interactions entre evel et d'autres genes actifs pendant la gastrulation a ete abordee: nous avons pu mettre en evidence que l'homologue du gene t participe au maintien de l'expression de evel dans la region caudale. Afin de debuter une analyse fonctionnelle de ces genes, plusieurs strategies, qui visent a les exprimer ectopiquement, ont ete mises au point (injection dans des oeufs au stade 1-cellule d'arns transcrits in vitro ou de plasmides portant la phase de lecture sous controle d'un promoteur fort). Aujourd'hui, nous disposons donc d'outils moleculaires destines a etudier la gastrulation et certains processus comme la mise en place des polarites qui lui sont concomitants. Des tests fonctionnels sont en cours de developpement et semblent confirmer l'existence d'une importante contribution de ces genes dans l'ontogenese. Il apparait donc de plus en plus clairement que le poisson-zebre pourrait permettre de faire avancer rapidement notre comprehension des interactions qui sont en oeuvre lors de la construction de l'embryon de vertebre