Abstract FR:

La glande sericigene de bombyx mori est constituee de deux populations cellulaires (psg et msg) qui se distinguent par l'expression differentielle de genes des proteines de la soie. Je me suis consacre a l'etude de l'un d'entre eux, le gene p25, qui s'exprime dans les cellules psg au cours des intermues larvaires. Mon travail a consiste a identifier les elements-cis regulateurs gouvernant l'expression de p25 et a savoir si leur accessibilite est contrainte par la presence de nucleosomes. Pour cela, j'ai developpe des approches permettant de caracteriser le gene dans la chromatine. De ces experiences, il ressort que la regulation de p25 depend de deux mecanismes : - dans les cellules psg, une organisation chromatinienne ouverte se met en place au niveau de la region 300/ +120 de p25, qui englobe les elements-cis necessaires a l'activation du gene. Le maintien de cette organisation quel que soit l'etat transcriptionnel de p25 pourrait etre lie a la fixation a l'adn de complexes proteiques en position 200 et +70. - l'activation de p25 a l'intermue depend de la fixation a l'adn d'au moins deux facteurs dans la region ouverte 300 / + 120. Il s'agit du facteur sgfb, specifique des cellules de la glande et d'un facteur psgf, encore inconnu. A la mue, l'absence d'interactions de sgfb et psgf avec leur element-cis conduit a la repression de p25. Pour preciser ces mecanismes, j'ai entrepris l'identification de sgfb. Les resultats montrent que sgfb contient l'homologue de la proteine forkhead, un activateur du gene de la soie sericine dans les cellules msg. Il existerait donc une combinatoire de facteurs propres aux cellules psg et msg qui cooperent avec forkhead pour specifier les genes de la fonction differenciee des deux territoires. Pour tenter d'identifier de tels facteurs, j'ai mis au point un protocole de purification du complexe contenant sgfb. Cette approche a conduit a isoler plusieurs proteines, dont les genes restent a identifier.