thesis

Etude d'appendix, un mutant floral de nicotiana tabacum ; mise en evidence de l'effet de la mutation appendix sur l'expression de genes homeotiques floraux

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Jan. 1, 1997

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Abstract FR:

Appendix (apx) est un mutant floral de nicotiana tabacum. Les etamines des plantes mutantes ont a leur sommet une excroissance formee d'un style et d'un stigmate monolobe de taille reduite. En dehors de cette excroissance, le phenotype de la plante est semblable au phenotype sauvage. La mutation apx est liee a un adn-t integre a la suite d'une transformation par agrobacterium tumefaciens. Il a ete possible d'emettre plusieurs hypotheses pouvant expliquer le phenotype apx. Ces hypotheses sont fondees sur le modele genetique expliquant la determination de l'identite des organes floraux : le modele abc. Selon ce modele, la perte des fonctions b ou le gain des fonctions c dans un groupe de cellules au sommet des antheres pourrait conduire au phenotype apx. Apx pourrait donc etre un gene de classe b ou c dont la regulation est modifiee par l'integration de l'adn-t. Il est egalement possible que le gene apx intervienne dans la regulation des genes de classe b ou c. Nous avons donc realise des etudes de rflp qui nous ont amene a conclure que le gene apx n'est pas un gene de classes b ou c. Le clonage du gene apx etait donc necessaire pour connaitre sa fonction. Pour tenter de cloner le gene apx, plusieurs techniques ont ete utilisees : la pcr inverse ainsi que la construction et le criblage de banques totales et partielles d'adn genomique. Cependant, nous n'avons pas pu isoler le gene apx. D'autre part, l'expression des genes de classes b et c pourrait etre modifiee chez le mutant apx. Nous avons donc entrepris des etudes permettant de comparer l'expression d'un gene de classe b (ntglo) et d'un gene de classe c (nag) dans les fleurs sauvages et apx. Ces etudes realisees par hybridation in situ nous ont egalement permis d'analyser en detail l'expression de nag et ntglo dans des bourgeons floraux sauvages a plusieurs stades de developpement. Dans les fleurs mutantes, nous avons montre le gene nag est plus fortement exprime au niveau du pistil et dans l'excroissance. Le gene de classe b ntglo s'exprime dans le pistil et l'excroissance des fleurs apx a differents stades, ce qui est inhabituel pour un gene de cette classe. Nous avons donc montre que l'expression des deux genes ntglo et nag est perturbee chez le mutant apx. Le gene apx interviendrait donc dans la regulation des genes de classes b et c.