Abstract FR:

Le complexe glycoproteique 1b-9 (gp 1b-9) des plaquettes joue un role essentiel dans l'adhesion des plaquettes au site de lesion vasculaire. Dans cette etude, un fragment de 1b alpha (residus 1-317) comprenant le site de fixation pour le facteur von willebrand (vwf) et pour la thrombine, ainsi que la glycoproteine 1b alpha entiere ont ete exprimes dans les cellules eucaryotes. Un systeme de selection accompagne d'amplification genique a permis l'obtention de cellules cho produisant une grande quantite de proteines recombinantes. Les cellules transfectees avec la sequence codant pour le fragment secretent une proteine de 48 kda dans le surnageant, celles transfectees avec la sequence codant pour la proteine entiere, une de 110 kda. Les deux proteines ont ete purifiees par chromatographie d'immunoaffinite. Elles fixent specifiquement vwf en presence de botrocetine et sont retenues par la thrombine. Une proteine de 125 kda a ete identifiee dans le lysat des cellules transfectees avec la sequence codant pour la proteine entiere. Le clivage du domaine transmembranaire c-terminal de la proteine de 125 kda semblerait faciliter la secretion dans le surnageant de la proteine soluble de 110 kda similaire a la glycocalicine. Gp 1b alpha est presente a la surface des plaquettes, sous forme d'un complexe constitue par 3 glycoproteines. Nos resultats demontrent neanmoins que l'expression de gp 1b beta et gp 9 n'est pas absolument necessaire pour l'incorporation de gp 1b alpha dans la membrane cellulaire