L'approche de la regulation hormonale par les methodes de la genetique moleculaire. Un modele : le gene fbp1 de drosophila melanogaster
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Paris 6Disciplines:
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Le premier volume de cette these consiste en une revue extensive et mise a jour sur les methodes en genetique moleculaire de la drosophile (99 pp. , 20 planches, 200 references). Le deuxieme volume est consacre a un travail experimental portant sur l'etude de la regulation hormonal du gene fat-body-protein-1 (fbp1) de drosophila melanogaster par les methodes de la genetique moleculaire. Nous avons etudie les sequences cis-actives importantes pour la regulation du gene par deux methodes de transformation: la transfection somatique et la transgenese. Nous avons pu ainsi mettre en evidence l'importance d'un petit fragment de 70 pb, possedant les proprietes d'un enhancer. Ce fragment contient un element de reponse a l'ecdysone (ecre). Nous avons ensuite applique une methode originale a l'etude des sequences cis-actives intervenant dans le niveau d'expression. Cette methode est basee sur l'induction de deletions par la transposase de l'element p a l'interieur d'un transgene prealablement etabli. Cette methode nous a permis de decouvrir en particulier deux regions notables: un element modulateur negatif situe en amont, et un court segment de 32 pb dont la presence est responsable d'une augmentation de l'expression du gene fbp1 par un facteur 10. Nous avons etudie l'effet d'un gene regulateur, le broad-complex (brc). Nous avons montre que brc a un double effet sur le gene fbp1: il active son expression dans le corps gras, le tissu ou fbp1 est normalement exprime, et il la reprime dans les glandes salivaires. Une cible de l'action de brc est localisee au voisinage de l'element de reponse a l'ecdysone mis en evidence precedemment. Brc est ainsi un regulateur de la specificite tissulaire de l'induction hormonale. Les implications de ces decouvertes pour la comprehension du probleme general de la regulation hormonale au niveau genique sont discutees