Abstract FR:

Les mecanismes moleculaires impliques dans l'etablissement du phenotype cholinergique sont peu connus. Un modele particulierement interessant pour l'etude de ces mecanismes est donne par la culture primaire de neurones sympathiques du ganglion cervical superieur (gcs) de rats nouveau-nes. Ces neurones, initialement noradrenergiques, peuvent devenir cholinergiques en presence de certains facteurs tels que le cdf/lif (pour cholinergic differentiation factor/leukemia inhibitory factor) et l'acide retinoique (ar). L'acquisition des proprietes cholinergiques se traduit par une augmentation de la production, du stockage et de la liberation de l'acetylcholine (ach). Le metabolisme de l'ach necessite differentes proteines specifiques, telles que l'enzyme qui synthetise l'ach la choline acetyltransferase (chat), et le transporteur vesiculaire de l'ach (vacht). Dans le but d'etudier les bases moleculaires de l'acquisition du phenotype cholinergique des neurones sympathiques du gcs, nous avons analyse l'effet du cdf/lif et de l'ar sur l'expression du gene chat. Dans cette optique, il etait important de comprendre le mecanisme de transcription du gene chat, qui fait intervenir plusieurs promoteurs. Cette etude nous a amenes a decouvrir dans le premier intron du gene chat la presence du gene codant le transporteur vesiculaire de l'ach. La localisation du gene vacht, en aval d'un des promoteurs du gene chat, suggere que les genes chat et vacht peuvent partager des unites de transcription. Nous avons ainsi analyse le mode de transcription du gene vacht et decouvert qu'il est transcrit aussi bien a partir de promoteurs specifiques qu'a partir d'un promoteur commun au gene chat. L'etude de l'effet du cdf/lif et de l'ar sur l'expression des genes chat et vacht dans les neurones sympathiques, a permis de demontrer que l'expression de ce deux genes est coregulee au cours de l'etablissement du phenotype cholinergique. Ce resultat suggere que l'organisation genique de ce locus cholinergique a un role fonctionnel