Un modele de site actif unique pour l'epissage des introns de groupe 2
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Paris 6Disciplines:
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Les introns de groupe ii se rencontrent dans les genomes mitochondriaux et chloroplastiques d'eucaryotes inferieurs et de vegetaux, et chez certaines bacteries. Leur chemin reactionnel en deux etapes est le meme que celui que l'on observe lors de l'epissage des introns nucleaires, mais il s'agit d'un processus autocatalytique ou l'arn catalyse sa propre excision. La presence de deux etapes utilisant des substrats presentant des configurations chimiques differentes pose le probleme du nombre de sites actifs catalysant les deux reactions successives. En utilisant une technique d'interference de modifications chimiques que nous avons adaptee aux arn de grande taille, nous avons localise des elements catalytiques necessaires aux deux etapes de l'epissage des introns de groupe ii, et identifie des structures necessaires a la realisation d'un changement de conformation ayant lieu entre les deux etapes. Par des experiences de mutations compensatrices, nous avons montre que les substrats des deux etapes successives interagissaient, ce qui prouve leur proximite au sein des structures actives. Ces travaux ont fourni des arguments allant dans le sens d'un modele de site actif unique catalysant les deux etapes de l'epissage des introns de groupe ii, et permis de mieux comparer les structures d'arn impliquees lors de l'epissage des introns de groupe ii et des introns nucleaires