Immunodiagnostic et immunociblage du virus de l'immunodeficience feline
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Dans le but de localiser des regions epitopiques potentielles de la proteine enveloppe du virus de l'immunodeficience feline, nous avons analyse sa sequence en utilisant des programmes informatiques d'antigenicite. Ces epitopes potentiels etant trop nombreux (superieures a 30), nous avons selectionne 5 peptides en se basant sur les proprietes biochimiques du virus de l'immunodeficience humaine. Les resultats obtenus avec 3 (p99, p100, et p102) de ces 5 peptides ont permis de detecter une seropositivite dans 88% des serums de chats infectes. Dans le but de developper un immunodiagnostic totalement fiable dans un deuxieme temps, nous avons utilise une banque aleatoire de peptides de l'enveloppe de la souche wo du virus de l'immunodeficience feline fusionnes avec la galactosidase. Nous avons teste cette banque avec des serums de chats infectes, et nous avons definit 2 nouveaux peptides p237 et p240 dont l'un, p237, s'est revele comme etant un epitope permettant un immunodiagnostic avec une fiabilite de 100% (sur 264 serums de chats testes). Dans la deuxieme partie de nos travaux nous avons utilise les peptides p100, p102, ainsi que p253 et p254 (contenant respectivement les sequences de p237 et p240) pour produire des anticorps polyclonaux susceptibles de reconnaitre l'enveloppe du virus de l'immunodeficience feline. Ces anticorps anti-peptides ont ete couples avec la glucose oxydase, la d-amino acide oxydase et la lactoperoxydase. Seuls les immunoconjugues formes de lactoperoxydase et d'anticorps anti-254 utilises en tandem avec les immunoconjugues formes de d-amino acide oxydase ou de glucose oxydase et d'anticorps anti-254, ont montre une activite cytotoxique specifique sur des cellules chroniquement infectes par le virus de l'immunodeficience feline