Etude structurale et proprietes codantes du tarn#l#e#u(ncm#5umaa) de levure et des tarn#l#e#u(xmaa) de buf
Institution:
Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Pas de résumé disponible.
Abstract FR:
Les acides ribonucleiques de transfert (tarn) constituent un important domaine de recherche en biologie moleculaire. Ils interviennent dans plusieurs processus biologiques dont le plus important est la synthese proteique. C'est dans ce cadre que nous avons purifie le tarn#l#e#u(u*aa) de levure et le tarn#l#e#u(xmaa) de buf et en avons determine les structures primaires en utilisant des methodes de marquages enzymatiques par du phosphate radioactif. La position flexible de l'anticodon de ces deux tarn est occupee par des nucleosides modifies u* et x, inconnus au moment ou nous avions demarre ce travail. Nous avons caracterise le u* comme etant la 5-carbamoylmethyl-2-o-methyl-uridine (ncm#5um) alors que les recherches sur l'identification du (ou des) nucleotide(s) x sont en cours. Les effets decodants du ncm#5um ont ete etudies: celui-ci ne peut s'apparier qu'avec le a et non le g. En plus de la structure primaire et secondaire, nous avons aborde l'etude de la structure tertiaire en solution des tarn, en utilisant une nuclease extraite de germe de seigle (rn i) specifique des regions simple brin, exposees a la surface de la molecule. Nous avons d'abord applique cette methode a des tarn a petite boucle variable: tarn#p#h#e et tarn#a#s#p dont les structures tridimensionnelles avaient ete etablies par diffraction aux rayons x, afin de l'affiner. Puis nous l'avons appliquee a des tarn a grande boucle variable: un tarn#s#e#r et cinq tarn#l#e#u dont ceux que nous avions sequences. Dans les deux tarn a petite boucle variable, la nuclease rn i coupe au niveau des boucles des dihydrouridines et de l'anticodon alors que dans les tarn a grande boucle variable, elle coupe egalement dans la boucle t dans le cas du tarn#s#e#r et au niveau de la boucle t et de la boucle variable dans les tarn#l#e#u. Plusieurs hypotheses ont ete formulees pour expliquer ces differences