thesis

Adn polymerases d'archaebacteries : sensibilite des archaebacteries halophiles a l'aphidicoline : purification et caracterisation de deux adn polymerases chez deux archaebacteries thermoacidophiles

Defense date:

Jan. 1, 1989

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Les archaebacteries constituent une troisieme lignee cellulaire intermediaire entre les eubacteries et les eucaryotes; nous nous sommes interesses aux adn polymerases de ces micro-organismes. Nous avons tout d'abord montre que la croissance et la synthese de l'adn in vivo chez des archaebacteries halophiles etaient inhibees par l'aphidicoline, un inhibiteur specifique de la replication chez les eucaryotes. Ce resultat suggere qu'une adn replicase, apparentee aux adn replicases eucaryotes pourrait exister chez ces archaebacteries. J'ai ensuite purifie et caracterise une adn polymerase monomerique, insensible a l'aphidicoline et thermophile chez l'archaebacterie thermoacidophile sulfolobus acidocaldarius. En collaboration avec s. Salhi et j. M. Rossignol, nous avons montre que cette enzyme pouvait repliquer a haute temperature un adn de phage uni-amorce et pouvait etre utilisee pour l'amplification genique par la methode de polymerisation en chaine. Enfin, avec a. Hamal, j'ai purifie et caracterise une autre adn polymerase monomerique, insensible a l'aphidicoline et thermophile chez une autre archaebacterie thermoacidophile phylogenetiquement eloignee de sulfolobus acidocaldarium: thermoplasma acidophilum. J'ai prepare des anticorps polyclonaux diriges contre l'adn polymerase de s. Acidocaldarius et j'ai montre que ces anticorps ne reconnaissaient pas l'adn polymerase de t. Acidophilum