Abstract FR:

Ce travail etablit dans une premiere partie la regioselectivite d'une demi-sonde phospholipidique photoactivable vis-a-vis des chaines aliphatiques du phospholipide dmpc a l'interieur d'une membrane modele. La benzophenone (groupement photoactivable) forme apres photoirradiation un carbinol en s'inserant dans des liaisons c-h des chaines aliphatiques du phospholipide. En absence de cholesterol cette insertion est aleatoire, en presence de 33 % molaire de cholesterol la position 13, situee a l'interieur de la membrane est preferentiellement attaquee et une photoconversion peut etre detectee a partir de la position 10. La deuxieme partie du travail traite du photomarquage d'une proteine transmembranaire, la glycophorine a, a l'aide d'une sonde phospholipidique, photoactivable et ayant un caractere transmembranaire. Il a ete possible de mettre au point des techniques de dosage des composants d'une membrane modele (glycophorine a et son fragment transmembranaire gpa-tm, dmpc et sonde transmembranaire photoactivable). De plus des proteoliposomes hautement charges en glycophorine a et en sonde transmembranaire ont pu etre reconstitues par differentes methodes, notamment celle des detergents. Finalement la partie transmembranaire de la glycophorine a a pu etre photomarquee. Des resultats preliminaires montrent une grande affinite pour les isoleucines et pour la glycine(83). Une reconstitution homogene indispensable pour un photomarquage de la glycophorine a a ete uniquement possible en presence de 33 % molaire de cholesterol.