Abstract FR:

La translocation de protons liee au transfert des electrons a ete etudiee dans la chaine respiratoire des mitochondries de pomme de terre par la technique des pulses d'oxygene. Apres determination des conditions optimales: absence de phosphate et de substrats endogenes, faible force proton motrice et extrapolation de la quantite de protons delocalises au temps 0, les rapports h#+/e# ont ete mesures pour les differents sites de phosphorylation. A 25c, la translocation des protons a lieu avec un rapport h#+/e# de 3,3 pour l'ensemble de la chaine, de 2,50 pour les sites ii + iii, de 1,85 pour le sire ii et de 1,15 pour le site iii. La diminution de la conductance membranaire par la temperature ameliore les rapports h#+/e#:3,65 pour les sites ii + iii, 1,95 pour le site ii et 1,73 pour le site iii. La relation obtenue entre la valeur du rapport h#+/e# et la valeur de la conductance membranaire montre que les rapports h#+/e# sont sous-estimes par la methode classique des pulses. Il faut en plus extrapoler les rapports h#+/e# a conductance nulle, ce qui donne des valeurs de 4,0 pour les sites ii + iii et de 2,0 pour chacun des sites ii et iii. L'etude particuliere de la cytochrome oxydase a alors ete entreprise. L'enzyme purifiee comprend 3 sous-unites principales (51, 34 et 31 kda) et 6 sous-unites de faible masse moleculaire (17, 15, 14, 11, 10 et 9 kda). L'activite maximale est de 80 moles de cytochrome c oxyde par seconde et par mole de cytochrome oxydase. L'activite de pompage de protons de l'enzyme reconstituee dans des liposomes peut donc maintenant etre envisagee