thesis

Contribution a l'etude des lipases de geotrichum candidum et de la lipoproteine lipase du lait. Caracterisation, regulation ionique et applications

Defense date:

Jan. 1, 1993

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Institution:

Caen

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La premiere partie du travail est consacree aux lipases exo- et endocellulaires de geotrichum candidum. L'activite proteolytique globale a ete egalement determinee. A partir de 211 souches de geotrichum candidum, nous avons pu, d'une part, mettre en evidence une tres grande heterogenite de l'activite lipasique et d'autre part, determiner l'incidence du milieu de culture, du ph, de la temperature et de la nature des ions sur la regulation de ces activites lipasiques. L'activite specifique a ete testee en comparaison avec les lipases d'autres microorganismes. Par chromatographie de gel filtration (fplc) nous avons pu montrer, qu'au niveau extracellulaire il n'existait qu'une lipase pour laquelle les differences d'activite en fonction du ph correspondraient a des modifications conformationnelles. L'autre partie du travail a porte sur l'etude de la lipoproteine lipase native et purifiee du lait de vache (lpl). L'accent a ete tout particulierement mis sur la regulation ionique de la lpl. Une approche cinetique approfondie nous a permis de montrer que la lpl est un systeme multi-sites et que le calcium est un inhibiteur competitif au niveau des sites de fixation du substrat