Régulation de l'activité squalène synthétase chez la levure saccharomyces cerevisiae : isolement du gene et détermination des modalités de régulation de son expression
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La squalene synthetase (ec. 2. 5. 1. 21) enzyme membranaire de la biosynthese, catalyse la transformation du farnesyl diphosphate en squalene, premier precurseur specifique des sterols. Le gene erg9 a ete isole chez le mutant fkerg9 de saccharomyces cerevisiae, affecte au niveau de la squalene synthetase, par complementation de la mutation erg9-1, a l'aide d'une banque d'adn genomique de levure. L'etude de l'activite squalene synthetase chez la levure et la synthese de squalene observee chez e. Coli porteuse du gene erg9 isole, nous a permis de conclure que le gene structural etait isole. L'analyse de la sequence nucleotidique du gene erg9 a mis en evidence un seul cadre de lecture de 1332 paires de base codant pour une proteine de 444 acides amines et de mr: 51. 600d. La sequence en acides amines deduite, presente des homologies avec la prephytoene synthase de rhodobacter capsulatus et l'analyse de la structure primaire de l'enzyme nous a permis de definir une partie c terminale hydrophobe et une partie n terminale semblable a l'invertase de levure. Le gene erg9 a ete localise sur le chromosome viii a 30 cm du cup1 et son expression est soumise a un controle de type transcriptionnel. La squalene synthetase n'est pas limitante dans la voie de biosynthese chez la levure par contre son integration au sein du reticulum est determinante sur l'activite enzymatique