Abstract FR:

Nous nous sommes interesses a la regulation de la polymerisation de l'actine. Deux niveaux de controle ont ete approfondis: l'hydrolyse de l'atp, associee a la polymerisation et responsable de l'etat dynamique des filaments, mais aussi l'interaction de l'actine avec le sous-fragment-1 de la myosine (s#1), conduisant a la formation de polymeres d'actine decores par s#1. Le mecanisme d'hydrolyse de l'atp a ete precise a l'aide d'analogues structuraux du phosphate: l'orthovanadate, le fluorure de beryllium (bef#n) et le fluorure d'aluminium (alf#n). Seules les especes bef#3#, h#2o ou bef#2(oh#), h#2o et alf#4# ont une forte affinite pour le site du gamma phosphate de l'atp sur le polymere. Leur interaction lente avec le site nous amene a proposer une etape d'isomerisation du polymere-adp-pi qui limiterait le depart du phosphate du filament d'actine. La perte et non le clivage du phosphate serait un commutateur entrainant une destabilisation des interactions entre sous-unites d'actine. Parmi les acides impliques dans les interactions entre sous-unites d'actine, les lysines jouent un role essentiel. La modification chimique de la lysine 61 de l'actine, par le pyridoxal-5-phosphate (plp), affecte l'actine dans ses proprietes de polymerisation et d'interaction avec la dnaase i. L'actine, ainsi modifiee, interagit avec s#1 mais ne polymerise que tres difficilement en filaments decores. Cette remarquable propriete a ete utilisee dans l'etude des interactions entre le monomere d'actine et s1. Nous avons pu ainsi mettre en evidence un complexe ternaire constitue d'un fragment s1 et de deux monomeres d'actine par fluorescence et pontage chimique. Les proprietes structurales et fonctionnelles du complexe sont comparables a celles du filament decore. Ces nouvelles donnees ont ete integrees dans le modele de la contraction musculaire