Clonage des genes codant pour le facteur de croissance du nerf (ngf) et la tyrosine hydroxylase chez le poulet et analyse de leur regulation transcriptionnelle
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Ce trvail concerne l'analyse de la regulation de l'expression genetique du facteur de croissance du nerf (ngf) ainsi que de l'enzyme tyrosine hydroxylase (th) au cours du developpement aviaire. Un cdna contenant les exons 5 du gene ngf de poulet a ete isole a partir de mrna de cur de poulet en utilisant la technique de pcr ancree. L'alignement de sa sequence avec celles des transcrits ngf de la souris et de l'homme montre que les premiers exons non-codants sont moins bien conserves entre le poulet et la souris ou l'homme que la region du dernier exon qui code pour la proteine mature. Apres clonage du gene ngf de poulet a partir d'une banque de cosmides, les exons ngf de poulet ont ete localisees dans 20 kb de dna. Ainsi le gene ngf de poulet est plus court que son equivalent murin qui couvre plus de 43 kb. De plus, l'organisation du gene ngf differe notablement dans sa partie 5 entre le poulet et la souris. Le gene de la th chez le poulet, qui a ete isole a partir d'une banque de cosmides, couvre 17 a 25 kb. Une sequence gre (element de reponse aux glucocorticoides) trouvee dans la region 5 flanquante a la position -1. 4 kb n'est pas inductible par la dexamethasone. La region promoteur proximale contient une boite tata et une sequence cre (element de reponse a l'ampc) qui confere l'induction de la transcription de la th par l'ampc; cette region suffit pour agir comme un promoteur constitutif pour le gene th et elle apparait etre controlee negativement par des sequences presentes en amont