Signification des chromosomes en ecouvillon des amphibiens : approches structurale et moleculaire
Institution:
Paris 6Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Pas de résumé disponible.
Abstract FR:
Nous avons aborde la signification biologique des chromosomes en ecouvillon des amphibiens en prenant comme modele d'etude les chromosomes de pleurodeles waltl. Des boucles reperes a morphologie caracteristique et a localisation precise ont ete considerees: les boucles granulaires et globulaires. La premiere etape a consiste a rechercher, au niveau structural, la signification de la variabilite morphologique observee au niveau des boucles laterales. Nous avons pu preciser que cette variabilite est liee a des variations au niveau des phenomenes transcriptionnels et post-transcriptionnels. La specificite morphologique de ces boucles correspond a un degre de compaction variable des fibrilles rnp qui constituent leur matrice, compaction entrainant une torsion plus ou moins accentuee de l'axe de la boucle. De plus, nous avons pu demontrer que cette variabilite morphologique peut etre induite experimentalement par des facteurs epigenetiques. Cette variabilite serait en fait le resultat d'interactions entre arn et proteines. Nous avons ensuite aborde la signification des boucles reperes au niveau moleculaire en analysant la nature et le devenir de leurs transcrits. Afin d'obtenir les sondes moleculaires necessaires a cette etude, nous avons utilise une approche directe qui a consiste a microdissequer ces boucles puis a cloner leur adn. A l'aide des sondes obtenues, nous avons pu montrer que les sequences clonees sont bien exprimees au niveau des boucles microdissequees, apportant ainsi la preuve du succes du microclonage. De plus, nous avons pu preciser que ces boucles presentent des sequences d'adn moyennement repetees, que la similitude morphologique des boucles globulaires reflete une similarite partielle de leurs sequences nucleiques, que les arn de ces boucles reperes ne sont stockes ni dans l'ovocyte ni dans l'embryon. Enfin, nous avons pu mettre en evidence des transcrits specifiques au chromosome sexuel w. Leur signification biologique reste a elucider