Abstract FR:

Une approche immunochimique a ete envisagee pour caracteriser la proteine kinase c (pkc), mediateur intracellulaire dont l'activite est regulee par le second messager diacylglycerol ou par les promoteurs de tumeurs de la classe des esters de phorbol. Nous avons produit et caracterise quatre anticorps monoclonaux diriges contre l'isotype gamma de la pkc: 3g12, 5a2, 15g4 et 36g9. Ces quatre anticorps monoclonaux reconnaissent specifiquement le domaine de regulation de la pkc-gamma provenant de differents mammiferes et deux d'entre eux (5a2 et 36g9) inhibent l'activite catalytique de l'enzyme dependante des effecteurs: ester de phorbol, phospholipides et calcium. Reciproquement, la liaison de 5a2 et de 36g9 est bloquee respectivement en presence des phospholipides et des phospholipides plus ester de phorbol. A l'aide de molecules de pkc-gamma deletees, nous avons determine que les residus essentiels a la structure des epitopes sont distincts des sites de liaison des effecteurs. Ces resultats suggerent que la liaison des phospholipides et de l'ester de phorbol induit des changements de conformation qui sont responsables de la perte de l'immunoreactivite de l'enzyme. Nous proposons donc que l'activation de la pkc par ses effecteurs est le resultat de modifications conformationnelles qui permettent a l'enzyme de lier le substrat exogene