Abstract FR:

Pour rechercher les sites d'action des agonistes cholinergiques au niveau du rein du rat, l'etude des variations de la concentration de calcium intracellulaire libre (cai) induites par le carbachol a ete faite sur des fragments de nephron microdisseques, en utilisant une sonde fluorescente: le fura-2. Sur le canal collecteur medullaire et sur le glomerule, le carbachol (0,1 mm) induit, via des recepteurs muscariniques probablement couples a la phospholipase c, une augmentation biphasique de cai composee d'une phase pic due a une liberation de calcium intracellulaire et d'une phase plateau due a l'entree de calcium externe par des canaux membranaires. La technique de microdissection a permis de separer le feuillet parietal de la capsule de bowman du reste du glomerule et de montrer que les reponses observees sur le glomerule entier sont essentiellement dues au feuillet parietal. Sur le feuillet parietal les deux phases de la reponse ont des sensibilites differentes, et les canaux calciques ouverts par le carbachol sont independants du voltage mais sensibles au nickel. La determination systematique de la quantite relative de fura-2 present sous la fenetre de mesure revele une diminution de la taille du feuillet parietal induite par le carbachol. Cette diminution qui est probablement due a un phenomene de contraction est aussi mise en evidence par visualisation directe avec une camera. La contraction peut aussi etre observee dans un milieu depourvu de calcium et dans des conditions ou le carbachol n'induit pas de variation de cai. Il est impossible de declencher une contraction du feuillet parietal par une depolarisation ou une hyperpolarisation, par une alcalinisation cellulaire, ou par une modulation des activites de la calmoduline ou de la proteine kinase c. Le carbachol induit une contraction du feuillet parietal en absence de variation de cai par un mecanisme qui reste a determiner