Abstract FR:

Dans la cellule vivante, les microtubules interphasiques sont des structures dynamiques, oscillant entre des phases d'assemblage et de desassemblage qui ressemblent a l'instabilite dynamique de microtubules polymerises in vitro a partir de preparations de tubuline. Ainsi, les microtubules cytoplasmiques sont generalement consideres comme ayant les memes proprietes que les microtubules in vitro. Dans cette these, nous montrons que les microtubules cellulaires sont intrinsequement stables, contrairement aux microtubules in vitro. En l'absence de facteurs de regulation, les microtubules interphasiques des fibroblastes resistent, dans leur grande majorite, a une depolymerisation par le froid, la dilution et le nocodazole. Dans les cellules d'origine epitheliale, les microtubules, bien que labiles au froid, sont egalement stables a la dilution et au nocodazole. Les proprietes dynamiques des microtubules cellulaires sont restaurees en presence de facteurs de regulation calcium- et/ou atp-dependants. Ces facteurs comprennent une activite de fragmentation regulee par le calcium, et une activite destabilisante atp-dependante dont le ou les effecteur(s) paraissent etre des proteine-kinases apparentees a p34#c#d#c#2. En effet, la proteine-kinase p34#c#d#c#2 destabilise les microtubules quand elle est appliquee sur des cellules lysees, tandis que les autres kinases testees n'ont aucun effet. Ceci suggere que la kinase p34#c#d#c#2, ou une kinase apparentee, pourrait phosphoryler des proteines associees aux microtubules, inactivant ainsi leur activite stabilisante. Des analogues des proteines stop, proteines responsables de la stabilite au froid des microtubules dans les tissus neuronaux, semblent etre les effecteurs de stabilisation des microtubules dans les fibroblastes. L'ensemble de ces resultats montre que la dynamique des microtubules dans les cellules est un phenomene controle a deux niveaux: d'une part des proteines associees stabilisent les microtubules, et d'autre part des effecteurs de la messagerie cellulaire controlent l'activite stabilisante des proteines associees