Abstract FR:

Nous avons caracterise deux nouveaux genes de streptomyces lividans tk24: amlb et amlc. Ces deux genes sont transcrits de facon divergente, chacun a partir d'un promoteur unique, en deux marns monocistroniques de 1,8 et 3 kb respectivement. Le promoteur d'amlb est tres semblable aux sequences promotrices eubacteriennes typiques alors que le promoteur d'amlc est tres similaire a celui du seul gene hyg de streptomyces hygroscopicus, codant pour une hygromycine b phosphotransferase. Le gene amlb code pour une proteine de 573 acides amines presentant en moyenne 73,7% d'identite en acides amines avec les alpha-amylases secretees de s. Venezuelae, s. Limosus et s. Griseus alors qu'elle n'a que 20,8% d'identite avec une autre enzyme amylolytique extracellulaire de s. Lividans tk24 decrite comme etant une alpha-amylase et codee par le gene amla (tsao et al. , 1993). L'expression d'amlb comme celle d'amla est inductible par de faibles concentration de maltose ou maltotriose, et repressible en presence de glucose. On note, dans les regions promotrices de ces deux genes, comme dans celles de tous les genes connus d'alpha-amylases de streptomyces, la presence de sequences repetees directes (dr) et/ou inversees (ir) du motif cttgc(a/c)g. La fonctionnalite de cette sequence en tant qu'operateur jouant un role dans l'inductibilite par maltotriose et la repression catabolique de l'expression du gene de l'alpha-amylase de s. Limosus a ete demontre par virolle et gagnat (1994). Amla et amlb sont donc susceptibles d'appartenir a un meme regulon. On ne retrouve cependant pas de sequences similaires dans la region promotrice du gene amlc situe en amont d'amlb alors que ce dernier code pour une proteine de 973 acides amines possedant de nombreuses identites locales avec des motifs d'enzymes hydrolytiques de polysaccharides de diverses origines bacteriennes. Les quatre boites d'acides amines retrouvees chez la plupart des enzymes amylolytiques sont presentes chez amlc. Amlc est susceptible d'etre une enzyme intracellulaire car elle ne semble pas posseder a son extremite nh#2 terminale de sequence signal permettant son excretion. Amlb/amlc ont et localises dans une zone instable du chromosome de s. Lividans, a 700 kb d'une extremite et a plus de 1300 kb d'amla