Cdc25, modulateur de l'activite des proteines ras et regulateur du cycle de division cellulaire de la levure saccharomyces cerevisiae
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
Au cours du cycle de division cellulaire de saccharomyces cerevisiae, l'etape start en phase g1 est une etape decisionnelle pour la poursuite du cycle vers la transion g1/s. L'adenylate cyclasxe, codee par le gene cdc35, est un des regulateurs positifs de start pour la poursuite du cycle. Les produits des genes ras controlent l'activite de l'adenylate cyclase dont un autre regulateur positif est le produit du gene cdc25. Nous avons clone le gene cdc25 qui presente un cadre ouvert de lecture de 1589 acides amines. Nous avons obtenu des anticorps diriges contre le produit cdc25. Dans la levure, le produit de cdc25 est peu abondant, presente une masse moleculaire de 180000 et est associe aux membranes. Deux suppresseurs de la mutation cdc25-5 ont ete etudies. Su25-1, suppresseur recessif, definit un element de controle negatif de la cascade de production de l'ampc. Le second est l'allele ras#i#l#e#1#5#2. Son produit a ete purifie; il presente une affinite diminuee pour le gtp et surtout pour le gdp. Compare a ras2 sauvage et ras2#v#a#l#1#9, il est le seul a echanger son gdp pour du gtp et activer l'adenylate cyclase in vitro. Pour effectuer l'echange gdp>gtp, ras#i#l#e#1#5#2 pourrait court-circuiter le besoin en facteur d'echange que serait le produit de cdc25. La partie 3 du gene scd25, qui supprime la mutation cdc25-5, code pour une proteine qui presente 47% d'homologie avec la partie correspondante du produit de cdc25. Elle a ete exprimee dans e. Coli. Des extraits proteiques de ces bacteries accelerent la vitesse d'echange gdp>gtp de la proteine ras2. Tous ces resultats suggerent que le produit de cdc25 est le facteur d'echange des proteines ras dans la levure. Les parties c-terminales des produits de cdc25 et de scd25 pourraient etre les prototypes de facteurs d'echange agissant sur differentes petites proteines g de diverses especes