Abstract FR:

Dans la glande sericigene de bombyx mori, la majorite du pool cellulaire d'actine cytoplasmique est incluse dans des microfilaments apicaux impliques dans l'exocytose des proteines de la soie. Ces filaments sont desorganises de maniere cyclique au cours des mues larvaires, concomitamment avec l'arret de la synthese de la soie. Dans le cadre de ma these, j'ai entrepris l'analyse fonctionnelle du gene d'actine cytoplasmique a3 par des approches complementaires in vivo et in vitro. Deux sites aux fonctions antagonistes, ra3 et sre, modulent l'expression du gene de maniere negative pour l'element ra#3 et positive pour l'element sre. De facon interessante, ce dernier element est structurellement et fonctionnellement homologue a celui present en amont des genes d'actine cytoplasmique de vertebres. Les observations realisees in vitro et dans la chromatine, par footprinting in vivo, suggerent que l'element sre fixe un facteur proteique, dont les caracteristiques sont tres proches du facteur srf humain. Parallelement a cette etude, j'ai isole et caracterise le quatrieme gene d'actine de bombyx mori (a4). Ce dernier code une actine cytoplasmique tres homologue a celle codee par le gene a3. La comparaison de sa sequence codante a celles d'autres genes d'actine cytoplasmique d'insectes suggere que ces genes ont evolue a partir d'au moins un gene d'actine ancestral commun. Le gene a4 possede une organisation moleculaire complexe avec deux promoteurs distincts. L'ensemble de ces resultats souleve la question de l'importance biologique de chacune des isoformes d'actine cytoplasmique. L'etude fonctionnelle de leurs genes dans la glande sericigene devrait permettre d'aborder les fonctions multiples de la proteine dans la physiologie cellulaire