thesis

Le virus herpetique du chien : structure genomique et organisation genetique de la region ul et des repetitions inversees

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Paris 7

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le virus herpetique du chien (chv) est un agent pathogene important en elevage canin. Il a ete classe parmi les alphaherpesvirinae sur la base de ses proprietes biologiques et jusqu'a present la biologie moleculaire de ce virus n'avait pas ete etudiee. A l'aide de fragments de restriction chevauchants, nous avons determine la structure et les cartes de restriction hindiii et ecori de son genome. La structure trouvee est semblable a celle d'autres genomes d'alphaherpesvirinae, notamment ceux du virus de la varicelle-zona (vzv) et du virus herpetique equin type 1 (ehv1). Elle se compose d'une gion u#l de 100 kb encadree d'une petite repetition inversee de 37 pb et d'une region u#s de 7,4-8,6 kb encadree d'une repetition inversee de 10,1-10,7 kb. Le sequencage des extremites des fragments de restriction nous a permis d'identifier et de localiser 35 genes et d'en deduire ainsi l'organisation genetique de la region u#l et des repetitions inversees. L'arrangement des genes y est analogue a celui qui existe dans le genome de ehv1, a l'exception notoire de l'absence des genes des sous-unites de la ribonucleotide reductase a l'emplacement attendu. Les homologies proteiques trouvees avec les produits de ces genes confirment l'appartenance de ce virus a la sous-famille des alphaherpersvirinae et au genre varicellovirus. Elles indiquent aussi qu'a l'interieur du genre, le chv est tres proche phylogenetiquement du virus herpetique felin, de ehv1 et du virus de la pseudo-rage. Les genes de la thymidine kinase (tk) et de la glycoproteine c (gc) ont ete entierement sequences. La sequence proteique de la tk du chv a ete comparee a celles des autres virus herpetiques. Afin d'utiliser ulterieurement ce virus comme vecteur de genes, nous avons construit un virus recombinant delete du gene de la tk. Nous avons aussi elabore un systeme base sur l'utilisation du virus de la vaccine, permettant l'expression de la partie n-terminale de la gc dans des cellules eucaryotes