Abstract FR:

Il existe dans le genome des mammiferes trois genes ras, harvey, kirsten et n-ras, actives par mutations ponctuelles dans un large spectre de tumeurs humaines ou experimentales. Ils sont exprimes dans tous les types cellulaires et codent pour quatre petites proteines g, presentant 80% d'identite entre elles, et dont la fonction est mal connue. Les analyses genetiques chez c. Elegans et d. Melanogaster ont montre que les genes ras sont impliques dans la transduction de signaux de differenciation. Les etudes biochimiques, realisees dans plusieurs systemes, y compris dans des cellules de mammiferes, ont souligne le role des genes ras dans la transduction de signaux mitogenes ou de differenciation. Etant donne qu'il n'existe pas d'outils specifiques permettant d'analyser la fonction de chacun des trois genes ras de mammiferes, nous avons decide de developper une analyse genetique du locus n-ras chez les mammiferes. Ce travail concerne l'inactivation du proto-oncogene n-ras par recombinaison homologue et decrit la construction d'un vecteur de ciblage, la determination de la frequence de recombinaison homologue, l'isolement de cellules es portant un allele n-ras inactive, puis leur microinjection dans des blastocystes de souris. Le test de transmission de cette mutation a la lignee germinale de certains animaux chimeriques obtenus est en cours. Une etude par cartographie a la rnase, a l'aide d'une sonde unique comportant des sequences complementaires de chacun des trois genes ras, nous a permis de quantifier les expressions relatives des genes harvey, kirsten et n-ras dans les differents tissus murins. Une telle information sera precieuse pour l'interpretation des phenotypes des mutants presentant une suppression de la fonction n-ras