Cinetique de l'osteogenese et effets de l'acide retinoique et de la 1,25 (oh)2 vitamine d3 sur la differenciation osteoblastique du clone osteogenique immortalise c1
Institution:
Paris 6Disciplines:
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Dans un premier travail, nous avons etudie la cinetique de la differenciation osteogenique in vitro. Lorsque les cellules c1 sont cultivees en agregats et traitees par l'acide ascorbique et le -glycerophosphate, une matrice collagenique est secretee et se calcifie des le 2eme jour. Apres 21 jours de culture. L'analyse histologique des coupes revele une intense mineralisation au centre de l'agregat. Les etudes biochimiques, histologiques et moleculaires montrent que la localisation, l'activite et l'expression de la phosphatase alcaline, diminuent au cours de cette differenciation osteogenique alors que les cellules c1 continuent a proliferer, en raison de leur immortalisation par le sv-40. Ainsi, ces cellules representent un modele unique dans lequel la differenciation osteogenique n'est pas associee a une modulation de la proliferation cellulaire. Dans un deuxieme travail, nous avons etudie la regulation de la differenciation osteoblastique du clone c1 par l'acide retinoique et la 1,25(oh)2 vitamined3 en utilisant la phosphatase alcaline comme marqueur de differenciation. Ces hormones ont des effets opposes sur l'activite phosphatase alcaline mais similaires sur la proliferation cellulaire. L'activite phosphatase alcaline, et les interactions entre l'acide retinoique et la 1,25(oh)2 vitamined3 sur cette activite dependent du stade de maturation cellulaire. Enfin le nombre de recepteurs nucleaires de la 1,25(oh)2 vitamined3 augmente avec la densite cellulaire et est augmente par l'acide retinoique qui ne potentialise pas l'effet de la 1,25(oh)2 vitamined3 sur l'activite phosphatase alcaline. L'ensemble de ces donnees montre l'interet du clone immortalise c1 pour analyser les mecanismes cellulaires et moleculaires de la differenciation osteoblastique, et mettent en evidence l'importance de la densite cellulaire dans le deroulement et l'expression osteoblastique au cours de l'osteogenese, et dans les effets regulateurs de la 1,25(oh)2 vitamined3 et de l'acide retinoique sur le phenotype osteoblastique