Abstract FR:

L'agent mutagene n-2-acetylaminofluorene forme un adduit sur la guanine qui constitue un bloc pour la replication de l'adn. Cette lesion va induire des mutations de type frameshift au sein de sequences de type (g)n et (gpc)n, la mutation correspondant a la deletion d'une unite de repetition. Afin de comprendre le(s) mecanisme(s) d'induction de ces mutations et le mecanisme de passage en face d'une lesion bloquante, nous avons construit des vecteurs contenant un adduit unique localise dans les differentes positions d'une sequence repetitive. Les resultats ont montre une frequence de mutation beaucoup plus importante quand la lesion se trouve sur la guanine situee en 3' de la repetition et ont permis de proposer un modele d'incorporation-glissement. Dans ce modele la polymerase incorpore une cytosine en face de la lesion generant un intermediaire de replication difficile a elonguer. L'appariement de cette cytosine avec la guanine situee en 5' de l'adduit va generer un intermediaire de glissement qui donne naissance a la mutation. Le gradient de frequence de mutation observe peut s'expliquer par le nombre (et la stabilite) des intermediaires de glissement qui peuvent de former. De plus, si la base en 3' de la repetition est une purine plutot qu'une pyrimidine la frequence de mutation est augmentee environ 5 fois. Afin d'etudier le mecanisme precis de la synthese en face d'une lesion nous avons construit des plasmides simple brin contenant un adduit aaf unique localise au niveau de ces points chauds. Nos resultats ont permis de montrer que les proteines sos induites umudc sont impliquees dans l'elongation des extremites ou la base terminale se trouve localisee en face de la lesion. Ces intermediaires ne conduisent pas a une mutation dans le cas de l'aaf mais correspondent aux intermediaires impliques dans la mutagenese par substitution induite. Par ailleurs, la mutagenese frameshift est independante d'umudc mais depend d'un autre facteur sos inductible.