thesis

Croissance de bacillus cereus et production de toxine diarrheique : evaluation de methodes substitution aux tests de toxicite sur animaux

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le travail presente concerne la croissance et la toxinogenese de bacillus cereus, un contaminant des aliments. Sur huit souches, nous avons developpe des conditions standard de culture du microorganisme, etabli un protocole d'etude de la production de toxine diarrheique au cours de la croissance, et analyse l'influence de differentes temperatures sur les parametres de la croissance et l'influence d'un sejour au froid prealablement a la mise en culture. La production de toxine a ete quantifiee chez 6 souches, l'une d'elles provenant d'un episode toxique alimentaire francais. L'etude a ete realisee a 32c et a 10c (ou 12c). L'activite toxinogene a ete mesuree a trois stades physiologiques differents. L'evolution comparee de la toxicite des filtrats de culture et de la toxicite intracellulaire a montre que la toxine est secretee. Cette secretion s'effectue essentiellement en phase exponentielle et, pour plusieurs souches, parait plus elevee durant la periode situee entre le milieu de la phase exponentielle et le debut de la phase stationnaire. Pour deux souches la quantite de toxine produite est tres faible aussi bien a 32c qu'a 10-12c. Le froid n'a pas d'influence sur la quantite de toxine presente en debut de phase stationnaire chez 2 autres souches ; il abaisse legerement cette quantite chez une autre souche et la fait chuter d'un facteur 10 chez la derniere. Les tests sur animaux utilises pour doser l'activite diarrheique sont critiques sur le plan de l'ethique veterinaire. Nous avons evalue ici deux methodes de substitution: un test immunologique et un test de cytotoxicite sur cellules animales. L'analyse statistique des resultats obtenus aux deux temperatures par les deux methodes indique une bonne correlation