Abstract FR:

Les histones et l'adn, constituants du nucleosome sont connus depuis longtemps comme faisant partie du vaste groupe des antigenes reconnus par le systeme immunitaire d'individus atteints de certaines maladies autoimmunes telles que le lupus erythemateux dissemine. Dans le but d'etudier les proprietes antigeniques des histones, nous avons a l'aide d'histones purifiees a partir de differents tissus, et d'une serie de peptides synthetiques couvrant toute leur sequence tester la liaison entre ces differents antigenes et anticorps. Nous avons ainsi pu montrer que l'activite antigenique dominante se situait dans les regions terminales des histones. A cote des histones, l'autre constituant du nucleosome est l'adn. Nous avons etudie l'existence de reactions croisees possibles entre l'adn et les histones. Nous avons mis en evidence que certains autoanticorps anti-adn etaient capables de reconnaitre a la fois l'adn et un peptide couvrant la region 83-100 de l'histone h3. Pour elucider de maniere plus quantitative cette double reconnaissance, nous avons ete amenes a mesurer les affinites entre ces anticorps et les antigenes impliques: l'adn, le peptide 83-100 et le nucleosome. Ces mesures, realisees grace au biocapteur biacore#t#m, ont montre que les anticorps etudies reconnaissaient avec une affinite croissante le peptide, l'adn et le nucleosome. Nous en avons conclu que ces anticorps seraient en realite des anticorps anti-nucleosome, sur lequel ils reconnaitraient un epitope conformationnel de surface constitue d'adn et de la region 83-100 de l'histone h3. Enfin, nous avons mis au point un test immunochimique par competition utilisant des anticorps anti-peptides d'histones et permettant d'etudier la topographie du nucleosome en solution dans des conditions natives. Nous avons ete en mesure de correler la nature de ces regions avec les donnees cristallographiques deja existantes et avec les specificites des autoanticorps afin de conclure sur le role du nucleosome dans l'auto-immunisation