Abstract FR:

Le protocole de cryoconservation mis au point pour les massifs d'embryons somatiques de palmier a huile comprend une deshydratation osmotique sur un milieu enrichi en saccharose, une deshydratation par evaporation en presence de silicagel, une congelation et un rechauffement rapides, puis un post-traitement sur des milieux progressivement appauvris en saccharose et enrichis en 2,4-d. Au cours de la deshydratation osmotique, les massifs d'embryons accumulent une quantite importante de matiere seche, principalement sous forme de saccharose, et perdent une partie de leur eau libre. Ceci entraine un arret momentane de leur croissance, une diminution temporaire de leur synthese proteique ainsi qu'une augmentation de leur teneur en eau liee. La deshydratation par evaporation des massifs d'embryons aboutit a l'elimination de toute leur eau libre. Ceci a pour consequence la vitrification de leur milieu intracellulaire au cours de leur refroidissement, phenomene directement correle a l'augmentation de leur resistance a la cryoconservation. Alors que la majorite des hydrates de carbone utilises pendant le pretraitement permettent aux massifs d'embryons de resister a la deshydratation, seuls certains composes sont susceptibles de conferer une resistance a la cryoconservation aux massifs d'embryons lorsqu'ils sont deshydrates. Par ailleurs, seul le saccharose permet aux massifs d'embryons de resister a la temperature de l'azote liquide lorsqu'ils n'ont pas ete deshydrates en presence de silicagel. Le protocole de cryoconservation a ete applique a des cultures polyembryoniques de 75 clones differents